一、菌种培养基的灭菌
培养基的灭菌是菌种生产成败的关键,未经灭菌的培养基中存在着大批的微生物,经常导致菌种污染,给生产造成丧失,目前菇农普遍采取的灭菌方法是常压蒸气灭菌。
常压蒸气灭菌的常压灭菌灶用砖砌成,选直径110厘米的铁锅,用砖砌高100厘米、直径120厘米的锅筒,内外用水泥抹光滑。
培养基装入灭菌锅后,用较厚的塑料膜和麻袋片把锅筒口包盖住,用绳子捆缚巩固,此后用旺火猛烧,在最短的时间内将锅烧开。待塑料膜鼓气后成馒头状时,说明锅已烧开,灭菌从这时开端计时,要延续8—10小时,确保灭菌彻底,一些菇农经常在灭菌上掉以轻心,因杂菌污染严重导致制种失败。常压灭菌时要做到“三避免”,一要避免中途降温,中途不得不得停火,如锅内达不到100℃,在规定时间内则达不到灭菌的目标。二要避免烧干锅,在灭菌之前锅内要加足水,在灭菌进程中,如果锅内水量不足,要及时从注水口注水。三要避免存在灭菌死角,如锅底着火部位不均,锅筒口处仅从一端漏气等等都可能涌现灭菌死角。
二、接种与培养
灭菌后的培养基可进行接种,接种就是将菌种移植到培养基上。从事接种的操作人员,必须建立威严的无菌观念,使操作者和接种工具处于威严的无菌情况。因此,必须对接种工具进行威严的灭菌,对操作环境进行彻底消毒,操作者的手和衣着也要消毒,威严遵守无菌操作规程。接种时要在接种箱内或接种室内进行。
接种时,先将接种箱或接种室内杂物消除干净,用2%来苏儿喷雾消毒。将待接种的培养基、菌种和所用工具放入接种箱或接种室工作台上,用福尔马林和高锰酸钾熏蒸接种箱、接种室至少半个小时,用量是每立方米空间用5克高锰酸钾,加10毫升甲醛,接种前用75%的酒精棉擦抹双手、母种试管或原种瓶外表,此后点燃酒精灯,进行操作。接种完毕,熄灭酒精灯,将已接种好的瓶或袋移至培养室培养。通常一支母种可扩繁原种4—5瓶,一瓶原种可扩繁栽培种40—50瓶或15—20袋。
培养室要维持干净并调好温度、湿度和空气、光照等环境条件,菌种培养的适宜温度以20—25℃,空气的相对湿度节制在60%左右为宜。发菌期间恳求暗光发菌,培养室要始终维持通风良好的环境条件,按此管理方法,菌种在40天左右就可长满瓶或袋。长满瓶(袋)的菌种如果不立刻使用,要放在0—10℃以下的环境中,可保藏1—3个月。